ｍＲＮＡ利用プローブ等による植物ウイルスの高感度検出手法の開発（２６０）

• 課題番号: 1992000516
• 研究機関名: 農業生物資源研究所（生物研）
• 研究分担: 企画調整分子育種・ゲノム研遺子構造研
• 研究期間: 継Ｈ０２～Ｈ０４
• 年度: 1992
• 摘要: クローニングしたイネ染色体ＤＮＡ断片を鋳型として挿入箇所の外側の配列をプライマーとしてＰＣＲを行い、ジゴキシゲニン（Ｄｉｇ）で標識したｄＵＴＰをＤＮＡ断片に取り込ませた。Ｄｉｇで標識されたＤＮＡをプローブとして用いてイネゲノムＤＮＡのサザンブロットハイブリダイゼーションを行ったところ、単一コピーの配列を検出できた。この標識法は従来のランダムプライム法に比して検出感度を１０倍程度向上させるとともに、標識とＤＮＡ断片調製を同時に行えるために検出ステップの効率化が図られた。
• カテゴリ: 植物ウイルス ライム