家畜のインターフェロン（１２５）

• 課題番号: 1992003544
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家畜衛試）
• 研究分担: 製剤・製剤工学研
• 研究期間: 完Ｈ０１～Ｈ０３
• 年度: 1992
• 摘要: 昨年度設計した遺伝子構造を元にして、新たにウシインターフェロンβ－３遺伝子の合成と組上げを行った。長いＤＮＡは品質上の信頼性が低いので、３０ｍｅｒ前後の比較的短いオリゴマーを３５本合成し、ＨＰＬＣで精製した。これらは各々、１５ｍｅｒずつオーバーラップしており、３ブロックに分けてアニーリングで組み上げた（ブロックＩ，ＩＩ，ＩＩＩ）。これらをｐＵＣベクターに挿入した。この方法（アニーリング法）は非常に簡便で迅速であり、本研究では３ブロックに分けたが、おそらく全遺伝子を一度に組み上げる事も可能であろう。昨年度の研究で、Ｐｒｏによって人為的にｔｕｒｎを起こす事により、シグナルの切断が制御されうることを明らかにした。本年度はこの系を用いて、シグナルの切断点をシフトさせることにより、リゾチーム（ＨＬＹ）のＮ末端にＡｌａ，Ｖａｌ，Ｌｅｕ，Ｌｙｓ，Ａｓｎを付加した改変体を作成し、その機能を野生型と比較した。その結果Ｌｙｓを付加したＬｙｓ－ＨＬＹは野生型よりも、高ｐＨ、高イオン濃度で高い活性を示した。
• カテゴリ: ごま