桑における澱粉枝作り酵素遺伝子のクローニング（９３）

• 課題番号: 1992003355
• 研究機関名: 蚕糸・昆虫農業技術研究所（蚕糸昆虫研）
• 研究分担: 生産技術・桑育種工研
• 研究期間: 継Ｈ０３～Ｈ０５
• 年度: 1992
• 摘要: 精製したイネのデンプン枝作り酵素（ＱＥ■）をＶ８プロテアーゼで消化してから、ＳＤＳ－ＰＡＧＥを行い、さらにＰＶＤＦ膜にブロッティングしてペプチド断片を得た。このうち４種類のペプチド断片について、気相シークエンサーで１０残基程度のアミノ酸の配列を決定した。これら各々のアミノ酸配列からｍＲＮＡの塩基配列を推定し、そのセンスとアンチセンスにあたるオリゴヌクレオチドを合成した。これをプライマーに、イネの胚乳から抽出したポリＡＲＮＡのｃＤＮＡを鋳型にしてＰＣＲ反応を行ったところ、プライマーの組合せによって特異的な長さのＤＮＡ断片の増幅が認められた。これらの断片はＱＥ■のクローンのスクリーニング時のプローブとして利用できる。
• カテゴリ: 育種 桑 効率的生産技術 品種