口蹄疫ウイルスの迅速な検出法の開発（１５４）

• 課題番号: 1995003616
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家畜衛試）
• 研究分担: 海外病研二・ウイ４研診断研予防疫学研
• 研究期間: 継Ｈ０６～Ｈ０８
• 年度: 1995
• 摘要: 家畜及び畜産物の輸入規制緩和及び拡大に伴い、口蹄疫侵入の危険性が増してきた。現在行われている口蹄疫の診断法では、結果が得られるまで日数を要し、被検ウイルスを増殖させるため危険性が高い。そこで、口蹄疫ウイルスを安全で高感度に検出する方法として検査材料からの遺伝子増幅法（ＲＴ－ＰＣＲ）を応用した検出法の開発を行う。６年度は、口蹄疫ウイルスの各タイプ（Ｏ，Ａ，Ｃ及びＡｓｉａ－１）の塩基配列をデータベースから収集し、ホモロジー解析により、各タイプ間でホモロジーが高い部位を検索した。その結果タイプＯ，Ａ，Ｃにおいては特に２Ａ領域のホモロジーが高いことが確認された。このことからＰＣＲ反応は１Ｄ（ＶＰ１）－２Ａ間を増幅し、より感度を高め、さらに特異性を高めるために一度ＰＣＲで増幅した断片をさらに内側のプライマーにより増幅するｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲを行えるようＰ１－Ｐ２の６３５ベースペアの領域とＰ３－Ｐ４の１６９ベースペアの２セットのプライマーをデザインした。
• カテゴリ: データベース モニタリング