ワクチンウイルスの大量培養法の検討（１１０）

• 課題番号: 1996003608
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家畜衛試）
• 研究分担: 企連製剤総合診断・衛生検査製剤工学研病原診断研
• 研究期間: 完Ｈ０５～Ｈ０７
• 年度: 1996
• 摘要: 近年、養殖魚のウイルス病が増加しているため魚類に対する有効なワクチンの開発が求められている。しかしそのためにはウイルスを大量に生産しなければならない。そこで大量培養に適した魚類由来の浮遊培養細胞株の作出を試みた。その結果、コイ上皮性ポックス由来のＥＰＣ細胞からＥＰＣ／ＮＩＡＨ細胞を、ウナギ腎臓由来のＥＫ－１細胞からＥＫ－１／ＮＩＡＨ細胞作出した。ＥＰＣ／ＮＩＡＨ株は高速回転浮遊培養すると０．５～１ｇ／Ｌの細胞が６～８日で３．５～４ｇ／Ｌに増殖し、ＥＫ－１／ＮＩＡＨ株を高速回転浮遊培養法すると０．５～１ｇ／Ｌの細胞が４～６日で３．５～４ｇ／Ｌに増殖した。これは親株と同程度だった。ウイルス感受性を検討するためＥＰＣ／ＮＩＡＨ株にＩＨＮＶを、ＥＫ－１／ＮＩＡＨ株には、ＩＰＮＶとＹＡＶを接種したところ親株の細胞と同程度だった。低温浮遊培養による細胞維持については、両細胞株とも浮遊細胞培養用フラスコに入れてＢｅｌｌｙ Ｄａｎｃｅｒシェーカー上で穏やかに撹拌しながら１３℃で維持培養を行うと、１カ月後の生存率はほぼ１００％、毎回維持培養液を交換することで長期間低温で細胞維持が可能となり、増殖安定性やウイルス感受性も変わらなかった。
• カテゴリ: 病害虫 防除