重力等物理的手法による形質転換技術の開発（２２８）

• 課題番号: 1998002288
• 研究機関名: 北海道農業試験場（北海道農試）
• 研究分担: 地域基盤・越冬研
• 研究期間: 完Ｈ０８～Ｈ０９
• 年度: 1998
• 摘要: ８年度に続き、重力処理によるイネカルスの形質転換のための条件を検討した。イネカルスにＧＵＳ遺伝子を持つベクターＤＮＡを混合して、４００，０００ｇの遠心重力処理後、カルスを選択培地で培養した。形質転換の有無はＧＵＳ活性で調べた。カルスの形質転換試験のコントロールとして、パーティクルガンによる形質転換を実施したところ、形質転換効率は７０％であった。重力処理では０．１Ｍ塩化カルシウムあるいは１０ｍＭスペルミジンを加えることで、ＤＮＡのカルス内への移行をほぼ１００％にまで高めることに成功したが、形質転換カルスは得られなかった。またＤＮＡ溶液に金粒子（径：０．６、１．０、１．６μｍ）あるいは、シリコンカーバイド粒子（０．４μｍ×５－６μｍ、０．３－０．４μｍ×５－１５μｍ及び０．７μｍ×１０－１２μｍ）を加えて遠心重力処理を行っても、形質転換カルスは得られず、重力を利用した形質転換技術の開発は困難であることが明かとなった。
• カテゴリ: 寒地 耐寒性