牛、鹿、羊における悪性カタル熱ウイルスの感染様式の解明（４５）

• 課題番号: 1998003695
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家衛試）
• 研究分担: 総合診断北海道・環境衛生研臨床微物研
• 研究期間: 継Ｈ０９～Ｈ１０
• 年度: 1998
• 摘要: 診断法の確立のため以下の点について検討した。１）ＰＣＲ産物を組み込んだプラスミッドを用いてＰＣＲの感度を検討したところ、１ｓｔＰＣＲでは０．１ｐｇ、２ｎｄＰＣＲでは０．１ｆｇ迄ウイルス遺伝子を検出できた。サイクル数を５ー１０回増やしたところ１ｓｔＰＣＲで１０ー１００倍、２ｎｄＰＣＲで同一か１０倍感度が上昇した。２）ｄｏｔーｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎによりウイルス遺伝子の検出及び特異性の検討が可能であった。３）パラフィン包埋組織からの遺伝子検出を、Ｐｈｅｎｏｌを用いる従来法と市販キットで比較したが、従来法が最も感度が良かった。４）Ｃｏｍｐｅｔｅｔｉｖｅ－ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ＥＬＩＳＡは、低希釈倍数の血清を用いても非特異的反応が認められなかった。
• カテゴリ: 害虫 羊