培養細胞系における有用遺伝子の発現技術の開発（３３）

• 課題番号: 1998003517
• 研究機関名: 蚕糸・昆虫農業技術研究所（蚕糸昆虫研）
• 研究分担: 遺伝育種・細胞工学研
• 研究期間: 継Ｈ０８～Ｈ１２
• 年度: 1998
• 摘要: 昆虫培養細胞を形質転換して外来遺伝子を発現させる際に、外部からの刺激により発現の調整可能な系の開発を目的とした。９年度はエクダイソン等により発現制御可能な遺伝子導入ベクターを構築するため、２０ーｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅに反応するカイコ培養細胞株を選抜した。またカイコエクダイソン応答配列（ＥｃＲＥ）が機能するＤＮＡ配列をＢｍＵＳＰ、ＢｍＥｃＲと複数のオリゴヌクレオチドとの結合から調べ、ＢｍＥｃＲのＡ、Ｂのアイソフォーム間でのＤＮＡ配列に対する選択性に大きな違いは見られなかった。ＢｍＥｃＲのＢ１アイソフォームを組換え蛋白質として大腸菌で発現させて粗精製した。ＢｍＵＳＰも大腸菌発現産物から粗精製し、イオン交換カラムとゲル濾過カラムを用いて精製した。
• カテゴリ: 育種 カイコ