バチルス菌の産生する殺虫性毒素の特異性評価法（１８９）

• 課題番号: 1998003650
• 研究機関名: 蚕糸・昆虫農業技術研究所（蚕糸昆虫研）
• 研究分担: 生産技術・虫害研
• 研究期間: 継Ｈ０８～Ｈ１１
• 年度: 1998
• 摘要: カイコの中腸解離細胞を用いたバチルス菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ（ＢＴ菌）の殺虫性毒素蛋白質のｉｎ ｖｉｔｒｏ検定法の開発を行うため、細胞調製に用いる蚕品種の検討及び、毒素の細胞への影響を細胞のアデノシン３燐酸（ＡＴＰ）量の変動で客観的にとらえる手法の確立を図った。まず、２種類の交雑種を用いて１～３齢幼虫の毒素（Ｃｒｙ１Ａａ型）感受性を比較したところ、毒素の経口投与後、１齢幼虫は２日後より、２、３齢幼虫では１日後より死亡虫が出始めた。各齢期とも毒素の５０％致死濃度（ＬＣ５０値）は３日後より安定し、品種内ではほぼ同じ値を示した。次ぎに原種２２品種の１齢幼虫についてＬＣ５０値を比較したところ、品種間で毒素に対する感受性に１０倍以上の差があることが明らかとなり、中腸解離細胞の調製の際、蚕品種を考慮する必要があることが示唆された。さらに毒素を投与した中腸解離細胞を２５℃で保温しＡＴＰ量を経時的に測定したところ、４時間後より、対照区との間で明瞭な差が見られるようになり、８時間後は、毒素投与区（毒素濃度：４μｇ／ｍｌ）のＡＴＰ量は対照区の１／４程度となった。これらの結果より、解離細胞への毒素の影響は毒素投与後４～８時間２５℃で保温しＡＴＰ量を測定することで検出可能となった。
• カテゴリ: カイコ 害虫 桑 評価法 品種