ストレスタンパク質による環境評価（８３）

• 課題番号: 1998005907
• 研究機関名: 養殖研究所（養殖研）
• 研究分担: 環境管理・技１研
• 研究期間: 継Ｈ０６～Ｈ１０
• 年度: 1998
• 摘要: ９年度は、ＨＳＰ７０の精製および免疫学的定量法の検討を行った。アマゴ肝臓抽出液を出発材料とし、種々の液体クロマトグラフィーを用いてＨＳＰ７０の精製を試みた結果、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｃｅｌクロマトグラフィー、ＡＴＰアガロースクロマトグラフィーおよびゲル濾過クロマトグラフィーを組み合わせることにより、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上で７２ｋＤａの単一バンドを精製することが出来た。精製した蛋白質を家兔に免疫して得られた抗血清から、ＩｇＧを精製した。精製ＩｇＧは、アマゴ肝臓抽出液のウェスタンブロッティングにおいて市販の抗ＨＳＰ７０モノクローナル抗体（ＳｔｒｅｓｓＧｅｎ社、ＳＰＡ－８１０）と全く同様に、７２ｋＤａの強い陽性バンド、１３０ｋＤａおよび７０ｋＤａの位置の極弱いバンドを認識した。以上の結果から、精製した蛋白質はアマゴのＨＳＰ７０であると考えられる。
• カテゴリ: 環境制御 管理技術 評価法