Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　ｐａｒａｇａｌｌｉｎａｒｕｍ赤血球凝集素遺伝子の単離（１１６）

• 課題番号: 1999004005
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家衛試）
• 研究分担: 細菌寄生虫・病原機能研（マレーシア国アセアン家禽病研究訓練センター）
• 研究期間: 止Ｈ０９～Ｈ１１
• 年度: 1999
• 摘要: 鶏の伝染性コリーザの原因菌であるＨ．ｐａｒａｇａｌｌｉｎａｒｕｍ（Ｈｐｇ）は、赤血球凝集素（ＨＡ）を発現し、赤血球凝集阻止試験（ＨＩ）によりＡ、 Ｂ、 及びＣの３つの血清型に型別されている。本病のワクチンによる感染防御には、ＨＩ抗体の上昇が特に重要と考えられているが、ＨＡ物質に関する遺伝学的な解析は少ない。そこで、組換えワクチン開発のための基礎的知見を得ることを目的として、ＨｐｇＣ型菌のゲノムライブラリーをファージベクターを用いて作成し、ＨＡ遺伝子の単離を試みたが、ＨＩ活性のあるモノクローナル抗体を用いたスクリーニングでは、抗体と反応するクローンは得られなかった。一方、免疫電顕では、菌体表面に細い縮れたフィラメント様突起物が標識観察された。すなわち、ＨＡ物質は、菌体外膜蛋白のような分子ではなく、巨大分子であることが判明した。そこで、コスミドライブラリーを作製し、約４００個のクローンのスクリーニングを行ったが、強く反応するクローンは得られなかった。一方、破砕した菌液の遠心沈渣に対して、種々の界面活性剤存在下で加温したところ、強い界面活性剤あるいは煮沸だけでも抗原性を失ったことから、これまでの方法では、菌体から十分量のＨＡを分離することは困難と判明した。
• カテゴリ: 病害虫 鶏 防除