ＮＭＲによる立体構造決定に基づく蛋白質－リガンド相互作用の解析（９６）

• 課題番号: 93
• 研究機関名: 農業生物資源研究所
• 研究分担: 生物工学・染色体研
• 研究期間: 継１０～１５
• 年度: 2000
• 摘要: オーキシン結合タンパク質（ABP1）遺伝子のORF部分をもとにしてPCRで断片を作成し、pETベクター（pET16b pET32b）に挿入した。大腸菌JM109株に組み換えベクターを導入しプラスミドの配列を確認した後、ベクターDNAを精製してBL21(DE3)株に再度導入した。このクローンを用いて3mlのLB培地を用いてタンパク質の発現をチェックしたところ、pET16b, pET32bのいずれのベクターについて良好な生育と発現を示した。大腸菌を破砕後、遠心分離した上清と沈殿について分布のチェックを行ったところ、pET32bの発現タンパク質は上清に存在したが、pET16bに導入したものは沈殿の画分に観察され、インクルージョンボディとして存在する可能性が示された。