過剰発現を利用した遺伝子単離（１２６）

• 課題番号: 120
• 研究機関名: 農業生物資源研究所
• 研究分担: 分子遺伝・遺伝発現研; 分子遺伝・ゲノ動態研
• 研究期間: 継１０～１２
• 年度: 2000
• 摘要: トランスポゼースを持つイネ9-17（Hmｒ）にTransformationでDS-EN（Bialaphosr）を導入したＴ１世代について転移頻度を調べた。５系統由来の５１個のＴ１植物体のサザーン解析により、３系統由来の10-13植物体でDS-ENの転移を示すバンドが認められた。またDS-ENを持つイネ１２系統に交配によりトランスポゼースを導入したＦ１世代についても転移頻度を調べた。交配により得た１２系統由来の６７個のＦ１植物体のサザーン解析により、６系統由来の８植物体でDS-ENの転移を示すバンドが認められた。一方DS-ENの近傍配列をTAIL-PCRにより１０系統およびsupression PCRにより６系統よりクローニングした．近傍数百塩基の配列を決定し相同性検索をした結果、既知のEST領域にヒットしたものが１系統，既知のゲノム配列にヒットしたものが２系統，ベクター領域にヒットしたものが７系統得られ、残り６系統はヒットしなかったので未知のゲノム領域と考えられた。