エリシター応答性イネ遺伝子プロモーターの機能解析（１６２）

• 課題番号: 160
• 研究機関名: 農業生物資源研究所
• 研究分担: 生物工学・糖鎖工学研; 生物工学・（部長）
• 研究期間: 完９～（１１）
• 年度: 2000
• 摘要: キチンオリゴマーエリシターに15分以内に応答して発現が誘導される遺伝子、ＥＬ3の上流域をグルクロニダーゼまたはルシフェラーゼ遺伝子をレポーター遺伝子として連結したプラスミドを作成し、エレクトロポレーション法によってイネプロトプラストに導入した。プロトプラストを種々の条件で培養し、これらのレポーター遺伝子産物の酵素活性を測定したが、エリシターによる有意な酵素活性の増大は認められなかった。この結果から、本遺伝子の発現調節を司る領域は上流域ではなく、転写される領域またはイントロンに存在する可能性が考えられた。エリシター応答性遺伝子、ＥＬ2、ＥＬ3プロモーターの植物体における活性を検討するため、まずエリシターの植物体への吸収、移行について解析した。切断葉の切り口から放射標識したキチン7量体を吸収させ、その葉身内移行を放射能を測定することによって推測した結果、用いた実験室条件ではキチン7量体は30分で約5cmずつ上部に移動することが明らかとなった。葉身における遺伝子発現を組織化学的に解析したところ、エリシター到達後30分で量遺伝子とも最大の発現量が観察された。これらの結果から、この2種類の遺伝子プロモーターはイネ植物体においてもキチンオリゴマーエリシター応答性を有しており、誘導性プロモーターとしての利用の可能性が示された。