ネグサレセンチュウ類の種間・種内における生化学的特性の解明（３０４）

• 課題番号: 289
• 研究機関名: 北海道農業試験場
• 研究分担: 生産環境・線虫研
• 研究期間: 完８～１１
• 年度: 2000
• 摘要: ネグサレセンチュウ類の迅速な同定法を確立するため、まず、各ネグサレセンチュウ種のアイソザイムパターン比較を行った。その結果、リンゴ酸脱水素酵素、ホソホイソメラーゼにおいて明瞭なシグナルが得られ、これらのアイソザイムパターンでネグサレセンチュウ類の識別が可能であった。しかし、この方法では同一種の線虫１万頭を必要とした。さらに高感度の同定法を開発するため、ＰＣＲ法を用いた同定法を開発することとした。まず、リボゾームＤＮＡのＩＴＳ領域の塩基配列を比較し、それぞれの種に特異的な塩基配列からキタネグサレセンチュウ、ミナミネグサレセンチュウ、チャネグサレセンチュウ、ノコギリネグサレセンチュウ、クルミネグサレセンチュウの５種につき種特異的プライマーを作成し、各線虫１頭から特異的なバンドが検出できることを確認した。この方法により、２期幼虫から雌雄成虫まで全てのステージで１頭でも同定が可能となった。さらに、上記のネグサレセンチュウ種とモロコシネグサレセンチュウ、パイナップルネグサレセンチュウの計７種について特異的検出用プローブを開発し、リバースドットブロットハイブリダイセーション法を用いた同定法を確立した。この方法により、１回のハイブリダイゼーションで農業上重要と思われるネグサレセンチュウの同定が可能になった。
• カテゴリ: 害虫 寒地 パイナップル りんご