果樹病原性子嚢菌類の形質転換系の開発(296)

課題名 果樹病原性子嚢菌類の形質転換系の開発(296)
課題番号 298
研究機関名 果樹試験場
研究分担 保護・病原機能研
リンゴ・病害研
研究期間 継10~12
年度 2000
摘要 平成10年度、ハイグロマイシンB(HygB)耐性遺伝子(hph)を選択マーカーとする糸状菌形質転換ベクターpSH75及びpAN7-1を用い、ポリエチレングリコール(PEG)法によってDiaporthe eres 3b株プロトプラストへベクターを導入して、3b株の形質転換体を得た。得られた形質転換体におけるベクターの組み込みを確認するために、組換え体から全DNAを抽出し、hphをプローブとするハイブリダイゼーションおよびhphを検出するプライマーセットによるPCRを行った。その結果、pSH75およびpAN7-1いずれの形質転換体においても、1~数コピーのベクターの組み込みが確認できた。
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