体細胞クローン作製技術を用いたジーンターゲティング法の開発（８４）

• 課題番号: 75
• 研究機関名: 畜産試験場
• 研究分担: 繁殖・生殖工学研; 繁殖・発生分化研
• 研究期間: 継１１～１４
• 年度: 2000
• 摘要: ウサギの体細胞でのジーンターゲッテング法について検討した。βアクチンのプロモーターの下流にルシフェラーゼを連結したベクターを用い、ウサギ胎子繊維芽細胞に対するリポフェクチンとエレクトロポーテーションによる遺伝子導入効率を比較検討した。リポフェクチンによる遺伝子導入の効率はエレクトロポーテーションに比べて低く、条件を満たすものではなかった。エレクトロポーテーションによる遺伝子導入条件は、電圧２５０Ｖ、キャパシタンス１００μＦ、内部抵抗１３Ωであった。また、βアクチンのプロモーターの制御下でＥＧＦＰ遺伝子を発現するカセットと、ピューロマイシン耐性遺伝子のカセットを連結したベクターを細胞に導入、選択を行った結果、この条件の有効性が確認された。
• カテゴリ: 繁殖性改善