胚幹細胞の成立機構の解明（９２）

• 課題番号: 80
• 研究機関名: 畜産試験場
• 研究分担: 繁殖・発生分化研
• 研究期間: 継１０～１２
• 年度: 2000
• 摘要: これまでに蓄積された変異マウス等を発生分化や組織・臓器再生機構解明等の研究に利用する場合、その研究素材として、それらの変異マウスに由来するES細胞は極めて有用である。そこで、これまで開発してきた胚幹細胞等の分離・増殖技術と培養系の基盤に立って、近交系マウスC57BL/6、異種由来ミトコンドリア置換コンジェニックマウスC57BL/6-mtSPRおよび肥満疾患モデルマウスC57BL/6-db/dbの３週齢雌に過剰排卵処理を行い、同系の雄と交配後3.5日目に胚盤胞を回収した。また、肥満疾患モデルマウスC57BL/6-ob/obでは、ホモ個体同士の交配により受精卵を採取することが出来ないため、体外受精由来胚盤胞を作製した。各胚盤胞は、フィーダー細胞層上で無血清ES培地を用いて培養してES細胞株を分離した。得られたES細胞はICRとBALB/c系マウス由来の８細胞期胚及び胚盤胞に注入してキメラ形成能を調べた。実験の結果、供試したいずれの系統のマウス胚盤胞からもES細胞株を樹立することができた。これらの樹立率は20％前後であり、従来の血清培養の場合（10％以下）と比較して改善された。また、C57BL/6-ob/obマウスの場合のように体外受精由来の胚からもES細胞を樹立することができた。また、得られたES細胞のキメラ形成能が確認された。
• カテゴリ: 繁殖性改善