インヒビンファミリーの高感度、特異的測定法の開発（５０）

• 課題番号: 43
• 研究機関名: 農業生物資源研究所
• 研究分担: 遺資二・動物保存研
• 研究期間: 完１２～１５（１２）
• 年度: 2000
• 摘要: 未分化な生殖細胞の分化に関与していると推定されているインヒビンＡの高感度かつ特異的な測定系の開発を行った。インヒビンＡの測定には、α鎖に対する特異的抗体およびβＡ鎖に対する特異的抗体の２種類を作成し、これらを用いてインヒビンＡ分子（α鎖とβA鎖の２量体）を挟み込むようなサンドイッチアッセイ法を用いた。インヒビンＡの測定系の測定感度は１０ｐｇ／ｍｌであった。また、インヒビンＡの測定系を用いて、卵胞液より単離精製したインヒビンＢ、アクチビンＡ、アクチビンＡＢ、アクチビンＢ、αモノマーとの交差反応を調べた結果、交差反応はいずれも０．２％以下であり、このインヒビンＡの測定系は極めて特異性が高いことが判明した。さらに、牛卵胞液を抗α鎖抗体をカップリングしたカラムでアフィニティー精製した後、ＳＤＳ－ＰＡＧＥを行い、ゲルを１ｍｍ間隔で切り出し、ゲルに含まれるインヒビンＡを測定した結果、このインヒビンＡの測定系は主として、５０ｋＤａおよび３２ｋＤａのインヒビンＡを認識することが明らかとなった。