始原生殖細胞へのＤＮＡ導入技術の開発（７３）

• 課題番号: 63
• 研究機関名: 畜産試験場
• 研究分担: 育種・遺伝制御研
• 研究期間: 完９～１２
• 年度: 2000
• 摘要: 始原生殖細胞は発生に伴い卵子や精子に分化する細胞であり、後代に遺伝子を伝達する細胞であることから、動物個体への遺伝子導入のためには最も適した細胞と考えられる。本研究では、取扱いが比較的容易なニワトリ始原生殖細胞を材料として、始原生殖細胞への効率的なDNA導入法の開発を試みた。孵卵2日目のニワトリ初期胚血液より採取した始原生殖細胞に、インビトロでリポフェクション法により外来遺伝子（lacZ遺伝子）を導入しレシピエント胚へ移植したところ、レシピエント胚生殖巣に取り込まれた始原生殖細胞においてlacZ遺伝子の発現が効率的に認められ、生殖巣に特異的に外来遺伝子を導入することが可能となった。また、ニワトリ初期胚血液より採取した始原生殖細胞を7日胚生殖巣由来の細胞をフィーダー細胞として培養した結果、短期間（4日間程度）ではある程度の増殖は認められたが、長期の培養は困難であった。始原生殖細胞を培養する際のフィーダー細胞のマイトマイシンC処理は、始原生殖細胞の増殖を阻害することが明らかとなった。さらに、放卵直後の胚盤葉にインビボで、リポフェクションおよびエレクトロポーレーションにより外来遺伝子（GFP遺伝子）の導入を行ったところ、胚体および胚体外組織でGFP遺伝子の発現と存在が確認された。また、この方法により卵巣、精巣を含む各種組織へGFP遺伝子が導入されたことが明らかとなった。
• カテゴリ: 鶏 繁殖性改善