体外受精胚の凍結保存技術の検討

課題名 体外受精胚の凍結保存技術の検討
研究機関名 広島県立畜産技術センター
研究分担 生物工学部
研究期間 H14~16
年度 2003
摘要 (1)試験の背景とねらい 経膣採卵・体外受精胚及び切断胚の供給を実用化するため, (1)経膣採卵・体外受精胚及び切断胚の凍結保存技術 (2)胚に耐凍性を付与する体外培養,修復培養技術 (3)経膣採卵・体外受精胚を効率的に作出する受精時期調整技術を検討する。 本年度は,血清無添加培養液で発生させた胚の耐凍性とガラス化凍結液の耐凍剤(エチレングリコール)濃度と融解後の胚生存性,細胞数について調査を行った。(2)試験項目,実施年度とその概略 ア 体外受精胚のガラス化保存法の検討(H14~16) イ 体外培養及び修復培養の検討 (H14~16) ウ 未受精卵子の成熟抑制法の検討(H14~15) エ 移植試験(H14~16)(3)平成15年度 成果の概要 ア 発生培養液ごとの胚盤胞期胚の凍結・融解後の生存性は,血清添加の有無に関わらず,全区とも良好であった。 イ 融解後24時間目の細胞数は,血清添加CR1aa- Vero区と血清無添加mSOF培養液区では同様の細胞数であったが,血清無添加CR1aa培養液区では低かった。 ウ ガラス化凍結時の前処理液濃度を3%もしくは10%EG+M2溶液+20%FCS,耐凍剤の濃度を25%,30%もしくは40%EGとしたときの,胚盤胞期胚の融解後の生存性は,全区とも大きな差は見られなかった。 エ EG30%区(VS30)が最も細胞数が多く,胚盤胞期胚のガラス化凍結液として優れていることが確認された。 オ EG濃度は前処理液10%,凍結液30%の組合せが融解後の発育性が良好であった。
研究対象 肉用牛
戦略 畜産,ゲノム等先端
専門 生命科学
部門 牛
カテゴリ 肉牛

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