クローン技術による種畜検定システムの検討

• 研究機関名: 広島県立畜産技術センター
• 研究分担: 生物工学部
• 研究期間: H14～15
• 年度: 2003
• 摘要: （１）試験の背景とねらい 平成6年度から，クローン家畜を用いた種畜の短期造成を目的として，クローン牛生産技術の研究を行い，一卵性5つ子を生産する技術を得た。この技術と2細胞期胚の割球分離技術を組み合わせ，経膣採卵・体外受精胚から種雄牛として利用可能な体外受精産子と，同一の遺伝子を持つ検定用クローン牛3頭を作出することによる種畜検定システムの検討を行う。 本年度は，核移植の効率化およびクローン牛の安定的作出を目的として，レシピエント卵子の凍結保存技術の検討，核移植胚の発生培養法の検討，および2分離由来体外受精胚とリクローン胚の移植試験を行った。（２）試験項目，実施年度とその概略 ア 体外受精胚の割球分離法の検討（Ｈ14） イ ２分離胚をドナー細胞としたクローン作出技術の検討（Ｈ14～15） ウ ドナー細胞の増幅技術の検討 （Ｈ14～15） エ ２分離胚，リクローン胚の受胎性の検討（Ｈ14～15）（３）平成15年度 成果の概要 ア 未受精卵子の単為発生率は30％EG区が最も高く，総細胞数も無処理区と差が無かった。また，30％EGでガラス化凍結したレシピエント卵子を用いて核移植した結果，無処理区と差のない発生率が得られた。 イ 核移植胚の胚盤胞発生率は，血清添加のCR1aa-FCS区と比較して血清無添加のCR1aa-BSA区は有意に低かったが，mSOF-BSA区は差がなかった。また，7日目胚盤胞の細胞構成は，mSOF-BSA区の内細胞塊細胞数が高くなる傾向が認められた。 ウ 2分離由来体外受精胚を受胚牛に１胚移植した結果，受胎率は56.0％(14/25頭)であった。受胎した2分離由来体外受精胚（Lot.1）とペアのリクローン胚を5頭の受胚牛に移植した結果，4頭が受胎し，体外受精産子と4頭のリクローン牛を作出した。またLot.2，Lot.3についてもリクローン胚が2分離由来体外受精胚とともに受胎した。
• 研究対象: 肉用牛
• 戦略: 畜産，ゲノム等先端
• 専門: 生命科学
• 部門: 牛
• カテゴリ: うど 肉牛