凍結保存した牛性判別胚割球からの核移植胚の作出

• 担当機関: 富山県畜産試験場
• 研究期間: 1999～2001
• 発行年度: 1999
• 要約: 凍結保存してある、発育ステージが後期桑実胚以降の牛性判別胚由来の割球をドナーとした核移植において、移植可能胚が作出できる。また、受卵牛へ移植した移植可能胚には受胎性が認められる。
• 背景・ねらい: 雌雄産み分け技術の進展には、性判別した牛の初期胚の割球をドナーとする核移植技術が有効である。また、発育ステージの進んだ初期胚や凍結保存してある胚割球を核移植に 用いることで、より効率的な受精卵クローン牛作出が期待できる。; そこで、凍結保存や性判別した胚割球の核移植法について検討した。

成果の内容・特徴

1. 凍結融解(ダイレクト凍結法・ワンステップ凍結法)やガラス化加温(VSED法)した、供核細胞として用いる胚から回収できる正常細胞数は、新鮮胚と比較して4.5日目胚で半分程度、6.5日目胚で同程度である（表１）。
   
2. 凍結保存やガラス化した4.5日目胚(16～32細胞期胚)の割球で核移植した場合、融合率は新鮮胚の割球と比較して低くなるが、分割率及び発生率にはあまり影響しない（表２）。
   
3. 性判別した6.5日目胚の割球から移植可能な核移植胚を作出できる。また、凍結保存した性判別胚では融合率、ガラス化した性判別胚では融合率・分割率・発生率のいずれも低くなるが、移植可能胚が発生する（表３）。
   
4. 受卵牛に移植した性判別胚割球由来の核移植胚には受胎性がある（表４）。
   

成果の活用面・留意点

1. 性別の明らかな牛核移植胚を作出できる。
   
2. 凍結保存したドナー胚を利用できる。