東南アジアのマイコプラズマ様病原体のDNA検出法の開発

• 担当機関: 国際農林水産業研究センター
• 研究期間: 1993～1993
• 研究担当者: 中島一雄; 林 隆治; Witcha Chaleeprom; Pisan Sirithorn; Porntip Wongkaew
• 発行年度: 1993
• 要約: 東南アジアに発生しているゴマフィロディー、サトウキビ白葉病、イネ黄萎病の病原体であるマイコプラズマ様微生物（MLO）のDNAプローブを作成した。これらを用いることにより、迅速・確実にMLOを検出することが可能になった。
• 背景・ねらい: タイ、ミャンマーで発生しているゴマフィロディー（図1）やタイ東北部のサトウキビ白葉病（図2）は、地域の農業に壊滅的な被害を与えている。イネ黄萎病（図3）はアジア各地に発生している。これらの病気は、マイコプラズマ様微生物（MLO）により引き起こされている。従来、これらの病原体を検出することは非常に困難であった。本研究では、MLOを迅速・確実に検出するため、DNAプローブを用いた検出法を開発することを目的とする。

成果の内容・特徴

1. イネ黄萎病罹病植物から全DNAを抽出後、Bisbenzimide-CsCl 平衡密度勾配遠心にかけ、病原MLOのDNAを宿主植物のDNAから分離した。それを制限酵素 Hind Ⅲで分解後、プラスミド Bluescript に挿入し、大腸菌 NM522に導入した。得られたクローンのうち、罹病植物のDNAと反応し、健全植物のDNAとは反応しないものを選抜した。それらの挿入断片にパーオキシダーゼを標識して、DNAプローブとした。
2. MLOの染色体に由来するDNAプローブと染色体外DNAに由来するDNAプローブがとれた。作成したDNAプローブを用いることにより、MLO感染イネから、迅速・確実・高感度にMLOを検出できた（図4）。また、MLO媒介昆虫（ツマグロヨコバイ）1匹からでも、MLOを検出する感度を有していた。
3. サトウキビ白葉病MLOとゴマフィロディーMLOにおいても、染色体由来・染色体外DNA由来のDNAプローブを作成することができた。

• 成果の活用面・留意点: これらのDNAプローブを用い、タイにおいても各病原MLOを検出することができた。本方法の適用により、ゴマフィロディー、サトウキビ白葉病、イネ黄萎病の病原MLOの媒介昆虫や中間宿主植物の解明、抵抗性品種の選抜等が容易になると思われる。
• カテゴリ: さとうきび 抵抗性品種