レンゲ毛状根を利用したダイズシストセンチュウ無菌培養法

• 担当機関: 北海道農業試験場
• 研究期間: 1994～1994
• 発行年度: 1994
• 要約: レンゲ毛状根を利用して、ダイズシストセンチュウ（SCN）を無菌培養する方法を開発した。RM培地に生育させたレンゲ毛状根に、表面殺菌したSCN２期幼虫を約150頭接種する。約３週間後、充実した卵嚢を形成している雌成虫を新しい毛状根培地に移植し、継代を行う。
• 背景・ねらい: in vitro系において植物寄生性線虫の基礎実験系を構築していくには、無菌線虫の利用が必要不可欠となっている。しかしながら、シストセンチュウにおいては、以前から二者培養法について種々検討されてきてはいるが、培養技術として具体的な情報を提供できるまでに至っていない。そこで、より簡便で効率化を目指すために培養基として毛状根を選び、無菌シストセンチュウを安定的に供給する方法を開発する。

成果の内容・特徴

＜培養の方法＞
　Agrobacterium rhizogenes（MAFF 02-10265）を感染させ、形質転換して得たレンゲ毛状根を等濃度のRoot-culture-medium（RM培地）で継代・培養する。このレンゲ毛状根培地にメトキシエチル塩化水銀420ppm．20min．で表面殺菌したSCN２期幼虫約150頭／９cmシャーレを接種する。約３週間後に充実した卵嚢を産生している雌成虫１頭または２頭を新しいレンゲ毛状根培地に移植していくことによって、継代を行う（第１表，第１図）。
＜本法の特徴＞

1. 　レンゲ毛状根によるSCN培養には、寄生率、生育所要日数等において大豆毛状根よりも優れている（第２表）。
   
2. 
   　レンゲ毛状根は、光を良く透過し、根内組織内に侵入寄生したSCN幼虫の観察が容易である（第２図）。
   

成果の活用面・留意点

1. 　本法により増殖したSCNの感受性大豆品種に対する寄生性に変化はない。
   
2. 　本法は、単にSCNの増殖に限らず、ステージ別発育速度の調査等多くの生態研究にも利用できる。
   

• カテゴリ: 大豆 品種