ＰＣＲを応用した豚ヘルペスウイルスの検出（５５）

• 課題番号: 1992003469
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家畜衛試）
• 研究分担: 研二・ウイ２研
• 研究期間: 継Ｈ０３～Ｈ０５
• 年度: 1992
• 摘要: 主要カプシドタンパク質遺伝子を標的とし、ＰＣＲを利用した豚ヘルペスウイルス１の検出条件を検討した。ＰＣＲ産物が９４８ｂｐとなる低ＧＣ含量のアンプリマーを用いた場合、変性９５℃で１分，対合４５℃で１分，伸長７２℃で１分の条件が標的ＤＮＡを特異的に増幅した。同種異株ウイルスの検出は可能であったが、同属異種の単純ヘルペスウイルスＤＮＡは増幅されなかった。精製ウイルスＤＮＡの検出限界はアガロースゲル電気泳動では１００ｐｇで、さらに非放射性プローブを用いたサザンブロットを行うと約１０ｐｇが検出可能であった。感染マウス臓器乳剤について本法とウイルス分離成績を比較すると、両者はよく一致し、ＰＣＲの有用性が示された。
• カテゴリ: 病害虫 治療技術 豚 防除