窒素固定関連遺伝子の発現様式の解明（１２３）

• 課題番号: 1993000393
• 研究機関名: 農業生物資源研究所（生物研）
• 研究分担: 機能開発・窒素固定研
• 研究期間: 完Ｈ０１～Ｈ０４
• 年度: 1993
• 摘要: ＲＫ２由来の広宿主域ベクターｐＲＫＭ２４８（約１０Ｋｂｐ）ならびにｐＲＫＲ２９０（約２０Ｋｂｐ）内に、ｐＭＣ１４０３中のプロモーターを削り取ったｌａｃＺＹ遺伝子を組み込んだ後、その遺伝子のすぐ上流に、ｐＯＨ２１３内に存在するｂｐｈＣオペロンのＳＤ配列、翻訳停止コドン、マルチクローニングサイト（ＭＣＳ）を含むＤＮＡ断片を組み込み、更にその上流にｐＫＫ６２ｂ－７中の転写ターミネーターを挿入することにより、広宿主域プロモーター検索ベクターｐＲＫＭＬ２４８ならびにｐＲＫＲＬ２９０を作成した。これらのベクター内のＭＣＳ中にＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅのｎｉｆＨプロモーター、Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅのｎｉｆＨプロモーター、構成的に発現する薬剤耐性遺伝子のプロモーター等を挿入した。得られたプラスミドをＡｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅならびに根粒菌（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）内に導入し、βーガラクトシダーゼ活性を調べた結果、予期される発現が認められた。
• カテゴリ: 育種 薬剤耐性