機能性ペプチドの利用による新食品素材の開発（２２０）

• 課題番号: 1993000512
• 研究機関名: 農業生物資源研究所（生物研）
• 研究分担: 分子育種・遺子構造研
• 研究期間: 継Ｈ０１～Ｈ０５
• 年度: 1993
• 摘要: 化学合成されたヒト上皮細胞成長因子の遺伝子（ｈ－ｅｇｆ）を染色体に組み込み、植物体に再分化させた形質転換タバコ（Ｒ０）の自殖後代（Ｒ１）を用いて、葉片の抽出液中のヒト上皮細胞成長因子（ｈＥＧＦ）を測定して、ペプチドが合成されているかどうかを調べた。スロットブロットハイブリダイゼーション法によってｈ－ｅｇｆ遺伝子ＲＮＡの発現量の最も多かった系統Ｔ７の後代を選び、若い葉（３ー５ｇ）を切取り、氷冷した乳鉢中で燐酸緩衝液を加えて磨砕し、遠心した後に上清を採り、粗抽出液とした。非放射性のｈＥＧＦ測定用サンドイッチ法ＥＬＩＳＡキット（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて粗抽出液中のｈＥＧＦを定量した。粗抽出液中の可溶性蛋白質は、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法で測定した。形質転換タバコＴ－７の後代の１０個体の葉片抽出液中のｈＥＧＦは、１７ー６５ｐｇ／ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎであった。対照（非形質転換タバコ）の粗抽出液中には、１０ー１５ｐｇ／ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎのａｎｔｉ－ｈＥＧＦ抗体反応物質が検出された。
• カテゴリ: 育種 機能性 たばこ