米のプロテアーゼインヒビターの特性解明（６０）

• 課題番号: 1994002690
• 研究機関名: 北陸農業試験場（北陸農試）
• 研究分担: 水田利用・品質評価研
• 研究期間: 完Ｈ０３～Ｈ０５
• 年度: 1994
• 摘要: 新形質米における米プロテアーゼインンヒビターの種類、存在部位、含有量等の検討と精製インヒビターの特性解明を目的に行った。脱脂米糠を原料とし各種のクロマトグラフィーによりトリプシンインヒビター（ＲＢＴＩ）とズブチリシンインヒビター（ＲＡＳＩ）を精製し、ウサギによりそれぞれの抗体を調製した。各抗体を用いたウエスタンブロッティング（ＷＢ）により、登熟・完熟・発芽種子のインヒビターの消長を調べた結果、両者とも登熟中期（開花後２週間）に出現・増加し、発芽中期（４日後）に分解されて減少する。両者とも種子の胚芽及び果種皮に局在し、胚乳部に存在しない。ＲＡＳＩはトリプシン、キモトリプシン、唾液アミラーゼ等を阻害せず、８０℃、４０分間の熱処理後にも約４０％の残存活性を示す耐熱性タンパク質であり、コクヌストモドキ幼虫およびニカメイチュウのアミラーゼに対して生体外で阻害活性を示した。イムノドット・デンシトメトリー法により新形質米４０点についてＲＡＳＩの含有量を比較した結果、ＲＡＳＩは全ての新形質米に普遍的に存在するものの、その含有量には約５倍量の開きのあることが明らかになった。また、突然変異系統を試料として、組織転写およびＷＢによってＲＡＳＩ含量の変動を調べた結果、含量の少ない２系統が得られた。今後、成果の公表に努めるとともに、害虫生体内におけるＲＡＳＩの酵素阻害作用についても検討を加える予定である。
• カテゴリ: 害虫 キノア 水田 水稲