七面鳥鼻気管炎ウイルス高感度検出法の開発（９１）

• 課題番号: 1996003593
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家畜衛試）
• 研究分担: 研三研二・ウイ４研病理３研
• 研究期間: 継Ｈ０７～Ｈ０９
• 年度: 1996
• 摘要: 本課題では七面鳥鼻気管炎ウイルス（ＴＲＴＶ）の高感度検出法を開発することを目的としている。７年度は、ＰＣＲ法の条件を検討した。ＴＲＴＶ－１４／１株感染ＣＥＦ細胞からＲＮＡを抽出し、ランダムプライマーを用いてｃＤＮＡを合成後、Ｆタンパク質遺伝子領域から設計したプライマーＦ１，Ｆ３の組み合わせによりＰＣＲを行った。この組み合わせの検出感度は４０ＴＣＩＤ５０に相当した。また、さらに感度を上げるため、プライマーＦ２、Ｆ５の組み合わせにより前述のＰＣＲ産物をテンプレートとしたＮｅｓｔｅｄ ＰＣＲを試みた。このＮｅｓｔｅｄ ＰＣＲの感度は０．４ＴＣＩＤ５０に相当し、非常に高い結果であった。本ＰＣＲ法を、１９９４年８月三重県に発生した頭部腫脹症候群（ＳＨＳ）発症鶏群の鶏５羽の気管及び鼻腔材料に応用した結果、気管の１／５及び鼻腔の４／５からＴＲＴＶが検出され、ＴＲＴＶとＳＨＳの関連性が示唆された。
• カテゴリ: 病害虫 診断技術 鶏 防除