一本鎖ＤＮＡを用いる２次元電気泳動法の開発（３６）

• 課題番号: 1996002258
• 研究機関名: 東北農業試験場（東北農試）
• 研究分担: 作物開発・育種工学研
• 研究期間: 継Ｈ０６～Ｈ０９
• 年度: 1996
• 摘要: 塩基配列既知の一本鎖ＤＮＡを電気泳動することでＤＮＡ２次元電気泳動法の条件を検討した。プラスミドｐＢＲ３２２を制限酵素ＨａｅＩＩＩで切断した断片を加熱変性により一本鎖に解離した。一本鎖ＤＮＡは分子内で会合する。この時塩基対を作らなかったシトシン塩基に対してヒドロキシラミンで修飾した。そして、１次元目をアクリルアミドゲルーディスク電気泳動をおこなった。これにピペリジンを作用させ修飾したシトシン部位で切断した後、２次元目をアクリルアミドゲルースラブ電気泳動で展開した。このように、一本鎖ＤＮＡを分子量の違いおよび塩基配列の違いにより分離を試みた。しかし、スポットの分離は認められなかった。これは、かなり短い断片に分解されたためと考えられた。
• カテゴリ: 育種 高付加価値 評価法