微生物酵素による新規オリゴ糖の製造技術（１７９）

• 課題番号: 1997004048
• 研究機関名: 食品総合研究所（食総研）
• 研究分担: 応微・酵素利用研
• 研究期間: 継Ｈ０３～Ｈ０９
• 年度: 1997
• 摘要: チコリ等の植物に含まれる多糖類イヌリンからオリゴ糖ＤＦＡ ■を生産することについて検討をおこなっている。Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ Ｃ１１－１株が生産するＤＦＡ ■合成酵素［ＥＣ ２．４．１．９３］の遺伝子のクローニングについて検討を行った。ＰＣＲ 産物の一部分を用いたプローブを化学合成した。このプローブを用いて、酵素生産菌のクロモソーマルＤＮＡのＰｓｔ Ｉ消化物に対してサザンハイブリダイゼーションを行うと約２Ｋｂのフラグメントとハイブリダイズすることが示された。そこで、Ｐｓｔ Ｉ消化物をアガロース電気泳動で分画し約２ｋｂの画分を回収した。この画分をｐＵＣ１１９と連結し、Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９ にトランスフォーメーションをかけ、遺伝子のライブラリーを作成した。このライブラリーに対してコロニーハイブリダイゼーションを行うことにより、Ｐｏｓｉｔｉｖｅなクローンが得られた。
• カテゴリ: 大豆 チコリ