ＭＨＣの特異的検出法の確立とＭＨＣ遺伝子複合体のＲＦＬＰ解析（１０）

• 課題番号: 1997000850
• 研究機関名: 畜産試験場（畜試）
• 研究分担: 育種・育種素材研
• 研究期間: 完Ｈ０６～Ｈ０８
• 年度: 1997
• 摘要: 免疫応答機構を明らかにするためには、抗病性や生体防御機構に密接に関連する主要組織適合性遺伝子（ＭＨＣ）の判定技術を確立する必要がある。本研究は、豚のＭＨＣ遺伝子クラス■および■について、ＤＮＡレベルでの検出法および判定法を確立することを目的とする。白血球全ＲＮＡを鋳型にし、ホットスタートを用いたＲＴーＰＣＲーＲＦＬＰ法により、豚ＭＨＣクラス■遺伝子４種のＤＮＡタイピング法を確立した。この方法で梅山豚やフィリピン在来ブタなど８品種のＭＨＣクラス■遺伝子（ＤＲＢ１、ＤＱＢ、ＤＱＡ）の判定を行い、その遺伝子構成について調査した。その結果、香猪由来中国系ミニ豚とフィリピン在来のイフガオブタにおいて、新しい遺伝子型を検出した。豚ＭＨＣクラス■遺伝子４種のＤＮＡタイピング法として極めて有効であることを明らかにした。クラス■遺伝子のうち、ＰＤ６遺伝子（クラス■ｂ）の多型の有無をＬＡ－ＰＣＲ／Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ法で検討し、多型性が認められないことを明らかにした。ＰＤ１遺伝子（クラス■ａ）について同様に検討し、多型性を見いだした。ゲノムＤＮＡを鋳型にしたＬＡーＰＣＲによりクラス■ＤＲＢ１遺伝子のエクソン１～エクソン３部分を増幅し、９．５ｋｂ／６．４ｋｂの増幅サイズ変異を見いだした。６．５ｋｂは一般的な豚品種に優勢であり、９．５ｋｂはイノシシ、ミニブタの系で優勢であることを初めて明らかにした。
• カテゴリ: 育種 品種 豚