炎症性サイトカインの制御技術の確立（１３８）

• 課題番号: 1998003791
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家衛試）
• 研究分担: 製剤・生理活性研（上席）
• 研究期間: 継Ｈ０９～Ｈ１４
• 年度: 1998
• 摘要: 豚ＴＮＦ－ａ、豚ＴＮＦレセプター（Ｐ５５）の遺伝子組換え体をバキュロウイルス発現系を用いて作製した。豚ＴＮＦレセプターは細胞外ドメインのみを発現させ、精製のためにＣ末にヒスチジンタグ（６ｘＨｉｓ－ｔａｇ）を付加した。このＨｉｓ－ｔａｇ付加により、Ｎｉ－カラムによるワンステップの精製が可能であった。このＣ末にＨｉｓ－ｔａｇを付加した豚ＴＮＦレセプターは、Ｗｅｈｉ－１６４細胞を用いたＴＮＦアッセイにおいて、豚ＴＮＦ－ａの活性を抑制した。培養豚肺胞マクロファージに豚莢膜肺炎菌及び豚丹毒菌を接種して、培養上清中の炎症性サイトカインの活性を調べた。その結果、豚莢膜肺炎菌の死菌を接種すると、ＩＬ－１、ＩＬ－６並びにＴＮＦが培養上清中に検出されるが、生菌を接種すると、ＩＬ－１とＩＬ－６は検出されるが、ＴＮＦは検出されなかった。このように、生菌か死菌かの違いによりサイトカインの応答性に違いのあることが示唆された。
• カテゴリ: 病害虫 豚 防除