ＮＭＲを用いたβ－チューブリン機能の殺菌剤による阻害機構の解明（１６９）

• 課題番号: 1999004285
• 研究機関名: 食品総合研究所（食総研）
• 研究分担: 食品工学・流通工学研（東洋大学理研）
• 研究期間: 継Ｈ１０～Ｈ１２
• 年度: 1999
• 摘要: 真核生物の細胞分裂や細胞骨格形成に関与するタンパク質β－チューブリンへの低分子薬剤の結合をＮＭＲにより検定する方法を確立するため、発現ベクターｐＥＴ－２９ａ（＋）にアカパンカビのβ－チューブリン遺伝子をクローニングし、大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）株で発現させた。この大腸菌破砕上澄み液を用いて、β－チューブリンと殺菌剤カルベンダジムとの結合を、ＮＭＲによるＴＲＮＯＥ法により検出した。一方、殺菌剤ジエトフェンカルブは大腸菌タンパク質と結合性を有し、未精製の発現β－チューブリンとの特異的結合の検定は不可能であった。１１年度は、発現β－チューブリンの精製法の検討、及び放射性同位元素標識殺菌剤を用いたゲル濾過法による発現β－チューブリンの薬剤結合活性検定法の検討を予定している。
• カテゴリ: 加工 薬剤