酵素及び微生物による低利用バイオマス資源の高度利用に関する基礎的研究（１２４）

• 課題番号: 123
• 研究機関名: 食品総合研究所
• 研究分担: 素材利用・素材化研; 応微・酵素利用研; 生物機能・分子情報研
• 研究期間: 単１１
• 年度: 2000
• 摘要: 不完全菌由来のキチン脱アセチル化酵素の効率的生産を目的として、大腸菌を用いた菌体外生産法の開発を試みた。キチン脱アセチル化酵素遺伝子にS. lividansのキチナーゼのシグナルペプチドをコードする塩基配列を連結し大腸菌中で発現させたところ、培地中に高活性のキチン脱アセチル化酵素が生産された。さらに６個のHisをC末に付加した組み替え酵素を作成したところ、Hisタグを付加した酵素はNi-chelating カラムのみの一段階の操作で培養液から容易に精製することができた。今回開発した方法を用いることによって、キチン脱アセチル化酵素の大量生産が可能となった。