キメラ酵素遺伝子の高効率フォールディング（２２３）

• 課題番号: 186
• 研究機関名: 食品総合研究所
• 研究分担: 流通保全・微トキ制研
• 研究期間: 完８～１２
• 年度: 2000
• 摘要: ドメインシャッフリングにより創出されたキメラ酵素は、発現の際に正しい高次構造がとれず、活性型で発現させることが困難な場合が多い。本課題は、このようなフォールディングの問題を解決し、キメラ酵素が正しい高次構造を有した状態で発現可能なシステムを構築することを目的とする。既に、分子シャペロンの利用、原核生物と真核生物の翻訳過程の差に着目した種々の発現ホストの利用、並びに固相表面におけるリフォールド系の確立などを行い、現時点で適用可能なほぼ全ての発現系等のセットアップを完了し、供給可能な状態としている。12年度は、11年度にリフォールディング系として有効性が示唆された手法（人工シャペロン）に着目し、汎用性に優れたリフォールディング手法の確立を目指した。その結果、分子内S-S結合を有するタンパク質も含めた、高次構造の異なる種々のモデルタンパク質のリフォールディングに有効に機能し得る人工シャペロン（種々の界面活性剤と高重合度シクロアミローからなる）の構築に成功した。今後はこの人工シャペロンのリフォールディング用キットとしての商品化を目指す。