酸性プロテアーゼのドメイン変換による機能解析（２４５）

• 課題番号: 206
• 研究機関名: 食品総合研究所
• 研究分担: 生物機能・分子情報研
• 研究期間: 完８～１２
• 年度: 2000
• 摘要: 朝鮮アザミの酸性プロテアーゼは高い凝乳活性を示すが、ヒマワリの酸性プロテアーゼは全く凝乳活性を示さない。また、キノコの酸性プロテアーゼは高い凝乳活性を示し、中性ｐＨで不安定であり、この性質により優れたレンネットであると考えられる。このように異なる特性を示す同族のタンパク質分子の部分構造に注目し、これらの構造と機能の解析を行う。１１年度までにヒマワリ酸性プロテアーゼの一次構造を決定し、キノコの酸性プロテアーゼの中性子結晶解析用単結晶を得るためウスバタケ由来酵素の新規な精製方法を開発した。１２年度は中性子結晶構造解析のため、ウスバタケ酸性プロテアーゼの大きな単結晶の調製と、ヒマワリ酸性プロテアーゼのプロセッシングについて検討を加えた。その結果、３段階のプロセッシングを経て植物特異的領域が除去され、最終的に２９ｋＤａと９ｋＤａのヘテロダイマーになることが明らかになった。植物特異的領域の３次元構造から分子表面に位置している比較的揺らぎの大きい部分からプロセッシングがおこり、最終的にこの領域が除去されるように根元の２箇所が切断されることを明らかにした。
• カテゴリ: ひまわり