花きのウイルス病防除技術の開発

• 研究機関名: 宮城県農業・園芸総合研究所
• 研究分担: バイオテクノロジー開発部
• 研究期間: 完H11～15
• 年度: 2003
• 摘要: ユリを対象としてウイルス病の発生実態を把握し、抗血清を用いた簡易診断法と遺伝子診断による正確で感度の高い検出技術を確立する。ユリの中にはウイルス病の症状が出にくい種はあるが、抵抗性の遺伝資源はない。そこで遺伝子組換え技術を駆使し、ウイルス病抵抗性付与技術を確立する。 ウイルス感染ユリ（各種品種）を用いて、ELISA、DIBA、RIPA、RT-PCRでの最適検出部位、生育ステージを明らかにし、ウイルス検定に適当な方法を検討する。パーティクルガン法を用いて、ウイルス遺伝子（CMV、LMoVのCP領域）を導入したユリを作出し、ウイルス接種試験により抵抗性を評価する。 ユリの各種品種におけるウイルス診断技術の確立。ウイルス外被タンパク質遺伝子を導入したウイルス抵抗性ユリの作出および抵抗性検定。 県内のユリ生産地におけるウイルス病発生状況を調査し、ユリモットルウイルス（LMoV）およびユリ潜在ウイルス（LSV)、キュウリモザイクウイルス（CMV）が発生していることを明らかにした。 LMoV、LSV、CMVの外被タンパク質遺伝子をクローニングし、塩基配列を決定した。 LMoV、LSV、CMVの抗血清を作製し、血清学的手法（DIBA）によるウイルス病診断技術を確立した。また、前記3種ウイルスの外被タンパク質遺伝子の塩基配列情報をもとに、RT-PCRを用いた遺伝子診断技術を確立した。さらに、これら診断技術の検出感度を明らかにし、試薬、消耗品に対する1試料あたりの診断コストを試算した。 ユリにおける遺伝子導入技術を確立し、ウイルス遺伝子を導入した形質転換体を作出した。 ユリにおける形質転換系の確立が困難であったため、ユリ形質転換体の作出が遅れ、研究期間内にウイルス抵抗性評価および発現解析まで至ることができなかった。遺伝的な安定性を確認するために形質転換次代におけるウイルス抵抗性の調査を行う必要がある。形質転換効率が低い。 DIBAを用いたユリの3種ウイルスの診断法（普及技術）
• 研究対象: ユリ
• 戦略: ゲノム等先端
• 専門: 育種
• 部門: 花き
• カテゴリ: 病害虫 育種 遺伝資源 簡易診断 きゅうり コスト 診断技術 抵抗性 抵抗性検定 品種 防除 ゆり