各種ソラマメウイルトウイルスの検出、識別技術

タイトル	各種ソラマメウイルトウイルスの検出、識別技術
担当機関	（独）農業技術研究機構中央農業総合研究センター
研究期間	1999～2001
研究担当者	御子柴義郎小林有紀大村敏博内藤孝（沖縄農試）萩原恭二（特別研究員）本田要八郎
発行年度	2002
要約	日本に発生するソラマメウイルトウイルス（BBWV）の多くはBBWV-2であるが、新種のBBWV-3も存在する。これらは血清学的手法（DAS-ELISA法）により識別することができる。
キーワード	ソラマメウイルトウイルス、アミノ酸配列、DAS-ELISA、種の識別
背景・ねらい	ソラマメウイルトウイルス（Broad bean wilt virus: BBWV）は宿主範囲が広く、日本各地で多数分離されている。これまで海外で分離されたBBWVの多くは血清学的手法（寒天ゲル内二重拡散法）により2つの種（BBWV-1およびBBWV-2）に分類されてきたが、同手法では分類を誤る可能性のあることが最近の研究から示唆されている。そこで、日本に発生するBBWVの分類学的な位置づけを明らかにし、各ウイルス種を検出、識別するための手法を開発する。
成果の内容・特徴	1. BBWVの精製法を確立し、BBWV-1およびBBWV-2の抗血清を作製し、DAS-ELISA法により両種の検定を可能にした。 2. 国内16県で採集したピーマン等18種の罹病植物より検出された34分離株はBBWV-2であり、BBWV-1は検出されなかった。 3. BBWV-2の抗血清と弱い反応が認められた2分離株（リンドウ分離株：AFV1およびN-1）は、粒子形態、核酸と外被蛋白質のサイズ、外被蛋白質のアミノ酸配列（図1）からファバウイルス属の新種であることが判明し、BBWV-3と提唱する。 4. BBWV-3の抗血清を作製し、DAS-ELISA法によりBBWV-1、BBWV-2、BBWV-3の検出および識別を可能にした（表1）。 5. 3種BBWVの外被蛋白質アミノ酸配列の相同性と血清反応（表1）との間に相関性が認められた。
成果の活用面・留意点	1. BBWV-1、BBWV-2およびBBWV-3の抗血清を用いることにより、BBWVによる病害の確実な診断が可能となる。
図表1
図表2
カテゴリ	病害虫そらまめピーマンりんどう