花芽形成に関与するリンゴ AFL 遺伝子の単離と発現

タイトル	花芽形成に関与するリンゴ AFL 遺伝子の単離と発現
担当機関	果樹試験場
研究期間	1998～1999
研究担当者	古藤田信博和田雅人
発行年度	1998
要約	リンゴから単離した AFL 遺伝子は、モデル植物において花芽形成に重要なFLO/LFY遺伝子と相同である。リンゴ AFL 遺伝子の発現から、この遺伝子がリンゴの花芽形成に関与していることが推定される。
背景・ねらい	モデル植物のシロイヌナズナの花芽形成に関わる重要な遺伝子として FLO/LFY が単離されている。この遺伝子は、栄養成長から生殖成長への切り替えをする遺伝子群のひとつである。リンゴのような樹木においても同様な遺伝子が働いているものと考えられた。そこで開花制御や結実促進に資するため、FLO/LFY に相同な遺伝子の発現をリンゴ花芽の茎頂部や組織別に調べた。
成果の内容・特徴	FLO/LFY に相同なリンゴの遺伝子を RT-PCR 法によって単離し、AFL 遺伝子と名付けた。FLO/LFY 遺伝子との相同性は、アミノ酸で約 90％あり高い値を示した。　「紅玉」果台から伸びた新梢の伸長は、６月下旬から７月中旬にかけて止まる。この時期に栄養成長から生殖成長への転換が起こっていると考えられる。この茎頂部での AFL 遺伝子の発現を in situ Hybridization 法によって染色したところ（図１）、茎頂部が形態的に花芽に分化する直前に発現していることが明らかになった。この時期以前には発現が認められなかった。また、葉原基も染色された。　「紅玉」の花、実生、茎頂培養の葉からそれぞれ組織別に RNA を抽出し AFL 遺伝子の発現をノーザン解析によって調べた（図２）。AFL 遺伝子は花器官では主にがくに、また、実生では成葉に、茎頂培養でも葉に強く発現していた。実生の根には全く発現が見られなかった。　「紅玉」の成葉からゲノム DNA を抽出し、制限酵素で切断後、AFL 遺伝子をプローブとしてサザン解析を行った（図３）。各制限酵素処理でそれぞれ複数本のバンドが見られ、AFL 遺伝子が複数コピー存在している可能性が示された。
成果の活用面・留意点	AFL 遺伝子が FLO/LFY と同様に花芽形成部とともに葉で強い発現が見られた。また、ゲノム中にこの遺伝子が複数コピー存在する可能性が示されたことから、花及び葉、それぞれの分化に複数の AFL 遺伝子が働いている可能性があり、花の分化に関わる AFL 遺伝子の同定には更に検討が必要である。
図表1
図表2
図表3
カテゴリ	りんご