光ピンセット法を用いた核・細胞操作法の開発

• 担当機関: 北陸農業試験場
• 研究期間: 1995～1996
• 発行年度: 1995
• 要約: 効率的に細胞・核融合体を作成するため、レーザー光を用いた光ピンセット法を開発した。それにより、任意の核、プロトプラストを選んで自由に接着、融合させることが出来る。
• 背景・ねらい: 細胞融合にはエレクトロフュージョン法、PEG法等種々の手法が開発されているが、いずれの方法も特定の細胞どうしあるいは細胞と核を接着さらには融合させることはできなかった。そのため、細胞融合体を細胞融合処理の後で選抜する必要があり、効率的な融合体獲得の上で問題があった。そこで特定のプロトプラストどうしを選んで融合させる方法を開発し、細胞融合操作後の融合体選抜というプロセスを省くことにより、より厳密な細胞操作を可能にする。

成果の内容・特徴

1. プロトプロトプラストへの単離細胞核の接着については、１個から３個までの単離細胞核を順次接着することにより、目的とする細胞核を自由に取り扱うことが可能であることが示された(図１a,１b,１c)。
   
2. 試料として用いたものの中で最も大きなヒメジョオンの花粉についてもレーザー強度を変えることにより、20％グリセリン水溶液の中で自由に捕捉し、移動することが可能であることが示された(表１)。
   

成果の活用面・留意点

1. 取扱が非常に簡単であり、初心者でも自由にプロトプラストを捕捉、移動できるので、種々の方面での利用が期待される。
   
2. 赤外線レーザーを用いた光ピンセット法については既に特許がとられており、研究用途以外で特許の問題が絡んでくる可能性がある。
   
3. 本手法は水稲細胞および細胞核に問題なく適用できる。
   

• カテゴリ: 水稲