PCR法による牛胚の性判別

• 担当機関: 埼玉県畜産試験場
• 研究期間: 1994～1996
• 発行年度: 1996
• 要約: 牛胚をPCR法によって性判別した結果、性の判別率は92%であった。性判別胚移植の受胎率は、新鮮胚、凍結胚でそれぞれ66%、32%であった。また、性判別胚移植により29頭の産子が得られ、その性が判別結果と一致したのは97%であった。
• 背景・ねらい: 雌雄を産み分けることができれば、需要に応じた性の子牛を計画的に生産することが可能になり、酪農・肉牛経営上のメリットは大きい。; そこで、近年開発されたPCR法（Polymerase Chain Reaction法）で性判別した牛胚を移植して、希望の性の産子を計画的に生産し、本技術の効果を実証呈示する。また、バイオプシー後の胚の生存率、性判別率に影響を与える要因等を調査する。

成果の内容・特徴

1. 性判別のために胚から少量のサンプル細胞を採取（バイオプシー）したところ、その後の胚の生存率（Bランク以上）は95.8%（298/311）であった。バイオプシー前のランクがAのものがBよりも生存率が高かった。（表1）
   
2. PCRの試薬としてXYセレクター（伊藤ハム）を用いて性判別した結果、性判別率は91.6%（272/297）であった。（表2）
   
3. 性判別率は変性細胞をサンプルとした場合に低く、正常細胞をサンプルとした場合はその細胞数に係わらず高かった。また、正常細胞をサンプルとすれば発育ステージによる性判別率に差はないと考えられた。（表3）
   
4. 性判別胚移植の受胎率は、新鮮胚で65.7%（23/35）と良好であった。一方、1.8Mエチレングリコール（EG）、またはこれに0.1Mシュークロースを加えた（EG+S）耐凍剤で凍結保存した胚の直接移植では、31.7%（32/101）の受胎率であった。（表4）これは、ほぼ同時期に直接移植された凍結無処理胚（耐凍剤EG）の受 胎率46.3%（19/41）に比べ低い傾向であった。また、例数が少ないもののEG+Sを耐凍剤とした場合に、EG単独よりも受胎率が向上する傾向があった。これらのことから、胚の生存性に対するバイオプシーの影響は、凍結保存によって強まるものと考えられた。しかし、耐凍剤の工夫によりこれを軽減できる可能性があると思われた。
   
5. これまでに性判別胚移植により29頭の産子が得られ、その性が判別結果と一致したのは96.6%（28/29）であり、本法はかなり精度が高いと推察された。（表4）
   

• 成果の活用面・留意点: 性判別の精度は高く、需要に応じた性の子牛を高率に生産できることから、関連機関と普及体制を検討中である。また、凍結性判別胚の受胎率が低いため、凍結保存技術については、引き続き試験を実施する予定である。
• カテゴリ: 経営管理 肉牛 乳牛