豚コレラウイルスに対する単クローン抗体の作製と野外分離株の反応性

• 担当機関: 家畜衛生試験場
• 研究期間: 1994～1997
• 発行年度: 1997
• 要約: 豚コレラ(CSF)ウイルス強毒ALD株とワクチンGPE-株に対する単クローン抗体(MAb)を20株作製した。これらのMAbパネルにより，20株のCSFウイルスは6タイプに分かれ，CSFウイルスと牛ウイルス性下痢・粘膜病（BVD-MD)ウイルスの識別だけでなくCSFウイルスの野外分離株とワクチンGPE-株の識別が可能であった。
• 要約(英語): Twenty monoclonal antibodies (MAbs) were produced against the virulent ALD or vaccinal GPE- strains of classical swine fever (CSF) virus. The MAbs were divided into 7 groups on the basis of the difference in the reaction spectrum to various CSF and bovine viral diarrhea-mucosal disease (BVD-MD) viruses. The panel of the MAbs could classify 20 CSF viruses into 6 types, and could discriminate between not only CSF and BVD-MD viruses but also the vaccinal GPE- strain and the field isolates of CSF virus. The results indicate that the MAbs are useful for diagnosis and investigation of CSF viruses. (Lab. of Clinical Microbiology, Hokkaido Research Station, TEL [phone])
• 背景・ねらい: 現在，豚コレラ（classical swine fever;CSF）清浄化推進事業が進められており，従来にもましてCSFの迅速診断が必要となっている。CSFの病原学的診断は，主として蛍光抗体法による臓器切片中のウイルス抗原の検出とウイルス分離により行われるが，強毒株とワクチン株の識別および豚にも感染性のある牛ウイルス性下痢・粘膜病（BVD-MD）ウイルスとの識別が重要となる。ポリクローナル血清では上記のウイルス株を識別できないため，CSFウイルスに対するモノクローナル抗体（MAb）を作出し，CSFウイルス野外分離株に対する反応性を調べた。

成果の内容・特徴

　 CSFウイルス強毒ALD株およびワクチンGPE^-株を免疫原とし，常法にしたがってMAbを作製した。スクリーニングは間接蛍光抗体法で行った。その結果，ALD株とGPE^-株に対するそれぞれ18株と2株のMAbが得られた（図１）。CSFウイルス20株とBVD-MDウイルス3株に対して蛍光抗体法によりこれらのMAbの反応性を調べたところ，I：すべてのCSFウイルスとBVD-MDウイルスに反応する抗体　II：すべてのCSFウイルスに反応するがBVD-MDウイルスに反応しない抗体　III：GPE^-株以外のすべてのCSFウイルスに反応する抗体　IV,V,VI：一部のCSFウイルスに反応する抗体　VII：GPE^-株にのみ反応する抗体の７群に分類された（表１）。このうちVIグループのMAbのみが中和活性を持っていた。
　 これらの７種の代表的なMAbパネルを用いることにより，CSFウイルスとBVD-MDウイルスの識別だけでなく，CSFウイルスの野外分離株とワクチンGPE^-株の識別が可能であった。また，CSFウイルスは6タイプに分かれ，抗原性の多様性が認められた（表２）。

成果の活用面・留意点

　 CSFを疑う症例の臓器凍結切片あるいは分離ウイルス感染細胞をこれらのMAbと反応させることにより，CSFの診断が可能である。

• カテゴリ: 豚