健康牛及び乳房炎牛における血液及び乳汁化学発光能

• 担当機関: 家畜衛生試験場
• 研究期間: 1994～1996
• 発行年度: 1996
• 要約: 乳房炎牛では健康牛に比べて乳汁ＣＬ能が著しく高く，血液ＣＬ能は逆に低いことが示された。また，同一ＰＬテスト値下での乳汁ＣＬ能と体細胞数は良く相関した。
• 要約(英語): This experiment was conducted to ascertain the levels of chemiluminescence(CL) activities of blood and milk in healthy and mastitis dairy cows, and to evaluate that the CL activity of milk could be an early diagnostic indicator of mastitis. CL activity of milk was much higher in mastitis cows than in healthy ones. On the other hand, CL activity of blood was much lower in mastitis cows than in healthy ones. Level of milk CL activity was good relative to that of somatic cell count under same PL value. The result suggests that CL activity can be an early diagnostic indicator of mastitis in cows. (Department of Pathology and Physiology, Lab.of Pathophysiology TEL [phone])
• 背景・ねらい: 乳用牛の乳房炎は，一度罹ってしまうと完治が非常に難しいため，発症の極く初期の段階での対処が特に重要になる。そのため，効率的な早期診断法の確立が強く望まれている。; そこで，血液と乳汁に共通して存在し，かつ乳質にも深く関わっている貪食白血球に着目し，貪食・殺菌時に放出される活性酸素量に比例して発生する光を測定する方法（化学発光測定法，ＣＬ法）によって血液及び乳汁中の貪食白血球機能を調べた。また，従来から乳房炎や乳質の判定に利用されているＰＬテスト値や乳汁体細胞数との比較検討も行った。

成果の内容・特徴

1. 健康牛群及び乳房炎牛群間における乳汁ＣＬ能と血液ＣＬ能，血液好中球数の比較
   　乳用ホルスタイン種５９頭を用いた。それらの牛を高乳量牛群(Ｈ群２４頭，日乳量約３４kg)，低乳量牛群(Ｌ群１５頭，日乳量約２０kg)及び乳房炎治療牛群(Ｍ群２０頭)に分け，各々の群での血液ＣＬ能，乳汁ＣＬ能，血液白血球数及び好中球数の比較検討を行った。血液及び乳汁ＣＬ能の測定法として，血液又は乳汁５０μｌにHepes Eagle's-MEM(細胞浮遊液)450μｌ，ルミノール(増光剤)１０μｌ，ザイモザン(細胞刺激剤)１０μｌを加え，化学発光測定器(ベルトールド社，Multi-Biolumat, LB9505C)を用いて測定を行った。その結果，血液ＣＬ能は，Ｈ群とＬ群に比べてＭ群は低い値であった。一方，乳汁ＣＬ能はＨ群，Ｌ群ともほぼゼロの値であったが，Ｍ群では著しく上昇した。白血球数及び好中球数は各群間での差は認められなかった。このように，乳房炎牛では健康牛に較べて乳汁ＣＬ能が著しく高く，逆に血液ＣＬ能は低いことが示された。血液ＣＬ能の主な由来白血球とされる好中球数の減少を伴わずに血液ＣＬ能の低下が起きたことは，乳房炎牛では貪食白血球そのものが機能低下を来していることが推察される(図１)。
   
2. 乳房炎治療牛群におけるＰＬ値と乳汁ＣＬ能及び乳汁体細胞数の相関性の検討
   　Ｍ群１０頭(４０分房)を用い，同一ＰＬ値下で乳汁ＣＬ能と乳汁体細胞数を比較検討した。その結果，これらは良く相関した（図２）。
   
3. ＰＬテストと乳汁ＣＬ能を用いての乳房炎診断の検討
   　ホルスタイン５６頭(２２３分房，１～６産)を用い，各産次数毎にＰＬ値の乳房炎診断基準を±以上又は＋以上にした場合及び乳汁ＣＬ能のそれを１X１０^６CPM以上または５X１０^６CPM以上にした場合の乳房炎の陽性率を比較検討した。その結果，ＰＬテスト値と乳汁ＣＬ能の値は同一傾向で推移した（図３）。
   

成果の活用面・留意点

　乳汁ＣＬ能は，細菌侵入とともに乳房内に集積する貪食白血球の数又は機能を反映しているため，早い段階での感染を検知できる。また，測定法そのものは非常に簡便である。従って，ＰＬテストの補完手法として，現場応用に結びつく基礎的データとなり得る。