卵白オボムコイドのＴ及びＢ細胞エピトープ

• 担当機関: 畜産試験場
• 研究期間: 1995～1997
• 発行年度: 1995
• 要約: 鶏卵アレルギーの主要原因タンパク質、オボムコイドについて、各種実験動物の抗体が結合するＢ細胞エピトープ及びマウス認識Ｔ細胞エピトープ領域を、合成部分ペプチドを用いて明らかにした。
• 背景・ねらい: 近年食物アレルギーが大きな健康問題となり、アレルゲンの有効な抗原性低減化方法の開発やアレルゲンに対する免疫応答機構の解明が急がれている。アレルギー発症に至る免疫反応には、Ｔ細胞、Ｂ細胞及び抗体が重要な役割を果たすことから、上記研究には、これら細胞や抗体に認識されるアレルゲン分子側の構造（エピトープ）に関する基礎知見が不可欠となっている。しかし、主要な食物アレルゲンのエピトープに関する研究は、実験動物を用いた基礎研究さえ十分行われていないのが現状である。従って本研究は、マウスをはじめとする各種実験動物を用いて、卵白アレルゲンタンパク質であるオボムコイド（ＯＭ）のエピトープを明らかにすることを目的とした。

成果の内容・特徴

1. 　抗ＯＭ抗体は、ヤギ５頭、ウサギ６羽、近交系マウスの３系統（Ｃ3Ｈ/Hｅ, ＢＡＬＢ/c及びＣ57ＢＬ/6）、クローズドコロニー１系統から得た。また抗ＯＭモノクローナル抗体（ＭＡb）17種を得た。これらの抗体とＯＭ分子全域をカバーするように合成した長さ８残基の部分ペプチド179種との反応性をＥＬＩＳＡで解析した。一例としてウサギを用いた結果を（図1）に示す。
   
2. 　得られたＢ細胞（抗体結合＞エピトープ領域のＯＭ一次構造上の位置を（図２）に示す。主要領域は、ヤギでは85-95残基目、ウサギ、マウスでは11-19残基目であった。ＯＭは、従来立体構造依存型のＢ細胞エピトープを持つとされてきたが、これらの結果により一次構造依存型エピトープも存在することが初めて明らかになった。
   
3. 　一方、17種のＭＡbのうち部分ペプチドと反応したものは４抗体に過ぎなかった。残りは立体構造依存型エピトープ結合性と推測され、ＯＭの抗原構造における立体構造の重要性が改めて認識された。
   
4. 　ＯＭ分子全域をカバーするように合成した長さ15残基の部分ペプチド 58 種を用いてＯＭに特異的なＴ細胞増殖刺激活性を持つペプチドを検索し、Ｔ細胞エピトープ領域を明らかにした（図３）。主要領域は、Ｃ３Ｈ/Ｈeでは100-114残基目、ＢＡＬＢ/cでは100-114及び15a7-171残基目、及びＣ57ＢＬ/6 では157-180（157-171及び166-180）残基目であった（図４）。
   

成果の活用面・留意点

低抗原性ＯＭの分子設計や経口免疫寛容機構の解析研究は、現状では実験動物系での基礎研究段階であるが、本成果は、その基礎知見として不可欠である。また、本研究で用いた手法・材料は、ヒトＩgＥ抗体レベルにあわせて超高感度化を図ることにより、アレルギー患者血清を用いた研究にも応用可能である。

• カテゴリ: 鶏 山羊