リンドウの腋芽のビーズ乾燥法による超低温保存

• 担当機関: 福島県農業試験場
• 研究期間: 1995～1995
• 発行年度: 1995
• 要約: 液体窒素によるリンドウの腋芽の超低温保存は、ビーズ乾燥法により可能である。5℃におけるハードニングを10日から25日間行い、800分から1100分乾燥することにより、再生後、約80%の節組織において正常な腋芽が伸長する。
• 背景・ねらい: リンドウの育種には、優良系統およびF₁育種用親株を長期的に維持・保存することが必要となる。しかし、実生による優良株の維持・増殖を行う場合、形質のバラツキと自殖による弱勢化が問題となる。優良個体の組織を超低温下で半永久的に保存し、必要に応じて植物体を再生できれば育種に役立つことから、取り扱いが容易な組織の超低温保存技術の開発が望まれていた。

成果の内容・特徴

1. 通気膜のついたプラントボックスで2カ月間培養したリンドウ(ササ×エゾ)の腋芽を含んだ節組織(約2mm)を用い、ビーズ乾燥法の手順は図1の通りである。
   
2. ハードニング処理は、1/2MS培地で約10日間、15℃において培養した後、10日から25日間、5℃で培養する(図2)。
   
3. 前培養は、1/2MS培地(0.7Mショ糖を加え、硝酸アンモニウムは除いた)で2日間、5℃において培養する。アルギン酸ビーズへの包埋は、切片を3%(w/v)アルギン酸ビーズに包埋した後、1/2MS液体培地(0.7Mショ糖を加え、硝酸アンモニウムは除いた)中で一晩、5℃において振盪する。
   
4. ビーズの乾燥は、25℃で風乾した後、クライオチューブに入れて液体窒素に投入する。
   
5. 液体窒素から取り出したビーズは、32℃で急速に加温した後、硝酸アンモニウムを除いた1/2MS培地に置床し、1週間後に硝酸アンモニウムを含んだ1/2MS培地に移植する。
   
6. 乾燥時間800分から1100分の間では、約80%の腋芽伸長率が得られる(図3)。
   
7. 超低温保存した腋芽は、正常に生育して植物体となる。
   

• 成果の活用面・留意点: 供試材料は、ササ×エゾ系統であり、他の系統については未検討である。
• カテゴリ: 育種 乾燥 りんどう