セイヨウナシのアグロバクテリウム法による遺伝子組換え技術

• 担当機関: 山形県立園芸試験場
• 研究期間: 2000～2002
• 研究担当者: 松田成美
• 発行年度: 2000
• 要約: セイヨウナシの茎頂培養個体の上位葉片を材料とし、アグロバクテリウム法を用いて、遺伝子組換え体の作出が可能である。
• 背景・ねらい: セイヨウナシの品種育成では、耐病性や日持ち性などの有用形質を付与する際に育種母体がなく、交雑育種が困難である。そこで、アグロバクテリウム法を利用した遺伝子組換え技術を開発した。

成果の内容・特徴

1. セイヨウナシ（品種「バラード」、「シルバーベル」）茎頂培養個体の上位葉片を材料にする。Agrobacterium tumefaciens EHA101あるいはEHA105菌株を用い、外来遺伝子を導入する（図1）。導入遺伝子は、イントロンを含むGUS遺伝子をカリフラワーモザイクウイルス35Ｓプロモーターに連結したpIG121－Hmである。
   　
2. 遺伝子導入処理をしてから、形質転換体が再分化するまでの期間は、「シルバーベル」を用いた場合、最短3ヶ月前後であり、感染8ヶ月後の形質転換効率は3.2％である（図1）。　
   　　
3. カリフラワーモザイクウイルス35SプロモーターにGUS遺伝子を連結した場合、作出した形質転換体における外来遺伝子のGUS活性は、個体、器官により差がある（図2）。
   

成果の活用面・留意点

　
1. 本技術を用いることにより、耐病性等の有用形質を付与したセイヨウナシの作出が可能である。形質転換効率には、品種間差がある。
   

• カテゴリ: 育種 カリフラワー ばら 品種