3　アユ冷水病研究　(2)アユ冷水病の高度診断技術等に関する研究　

• 研究機関名: 群馬県水産試験場
• 研究分担: 水産環境グル－プ
• 研究期間: 継H17～19
• 年度: 2005
• 摘要: ○目的：分子生物学的手法（PCR法）によるアユ冷水病診断法が活用されているが、感度や特異性の点で問題があることが指摘されている。そこで、冷水病菌の新規遺伝領域の塩基配列を決定し新たなPCRプライマーを設計することにより高感度かつ高特異性のアユ冷水病のPCR検査法を開発する。○計画：PCR診断の新標的となる冷水病菌の新規遺伝子領域塩基配列決定。冷水病PCR診断において擬陽性の原因となる可能性が高い冷水病菌近縁細菌における同遺伝子領域塩基配列の決定。これらの塩基配列データを基に冷水病菌特異的PCRプライマーを設計する。○得られた結果：冷水病PCR診断の新たな標的遺伝子領域をDNAジャイレースのBサブユニット領域(gyrB)とし、その塩基配列を決定した。現在、冷水病PCR診断の標的としてgyrBが用いられているが、この従来冷水病菌のgyrBとされていた領域は、トポイソメラーゼIVのBサブユニット領域(parE)であった。冷水病PCR診断において擬陽性の原因となる可能性があり、新規冷水病菌検出プライマーの設計において特異性の検討に必要な冷水病菌類似細菌を環境中より多数分離した。これらの菌株においてもgyrB領域の遺伝子配列を決定した。冷水病菌と冷水病菌類似細菌のgyrB領域の塩基配列を比較し、冷水病菌特異的プライマーを設計した。このプライマーは冷水病菌に対して十分に特異的で、冷水病PCR診断における擬陽性出現の低減に有効であると思われた。○残された問題点：新規冷水病菌特異的PCRプライマーによる冷水病診断方法の検討。同プライマーを利用したタイピング法の開発。アユ鰓洗浄液、付着藻類および環境水をサンプルとしたこれらの方法の実施可能性を検討。さらに同方法による予備実験的なアユ冷水病保菌検査と疫学調査の実施により、養殖場や天然水域における冷水病罹患アユ以外の感染源を探索する。
• 研究対象: アユ
• 専門: 水産増養殖
• 部門: 河川湖沼等
• カテゴリ: 診断技術