キノコ類の糖質分解酵素系の解明及びその作用の解析（８１４）

• 課題番号: 1993004879
• 研究機関名: 森林総合研究所（森林総研）
• 研究分担: 生物機能・きのこ育研
• 研究期間: 継Ｈ０３～Ｈ０６
• 年度: 1993
• 摘要: シイタケＦＭＣ６６及びナメコＦＭＣ２６８株の糖質分解酵素の大量精製法を検討した。菌株をブナ鋸屑・米糠（８：１）培地で２５℃、３７日から６０日間培養した後、培地に培地１ｋｇ当たり３ｌの純水を加え一昼夜放置し、粗酵素画分を抽出した。セロビオース分解活性に注目し、硫安沈澱による濃縮、ＱＡＥ－セファデックスＡ－２５、Ｑ－セファロース、Ｓ－セファロース及びセファクリルＳ－２００でのクロマトグラフィーを行ない酵素を精製した。培養した培地７．２ｋｇより８つのセロビアーゼ画分を精製し、２画分は電気泳動的にほぼ単一に精製できた。培地の着色成分の除去には、ＤＡＥＡ基型よりＱＡＥ基型のイオン交換クロマトグラフィーが有効であった。活性測定にマイクロプレートを用いる微量法を導入して効率化を図ったが、さらに高感度な蛍光測定法の導入が必要なことが分かった。
• カテゴリ: 育種 遺伝資源 くり しいたけ なめこ